태국의 모기 퇴치를 위해 현지 식품 가공 공장을 테스트한 이전 프로젝트에서, Cyperus rotundus, 갈랑갈, 계피의 에센셜 오일(EO)이 이집트숲모기(Aedes aegypti)에 대해 우수한 모기 퇴치 효과를 나타내는 것으로 나타났습니다. 전통적인 모기 퇴치제의 사용을 줄이기 위해살충제그리고 내성 모기 개체군에 대한 통제를 개선하기 위해, 이 연구는 에틸렌 옥사이드의 살충 효과와 피레트로이드 내성 및 민감성 균주를 포함한 이집트 모기에 대한 페르메트린의 독성 사이의 잠재적인 상승효과를 식별하는 것을 목표로 했습니다.
C. rotundus와 A. galanga의 근경과 C. verum의 수피에서 추출한 EO의 화학적 조성 및 살충 활성을 감수성 균주인 Muang Chiang Mai(MCM-S)와 내성 균주인 Pang Mai Dang(PMD-R)에 대해 평가하였다. 이집트숲모기(Aedes aegypti) 성충에 대한 EO-퍼메트린 혼합물의 살충 활성을 평가하였다. 이집트숲모기(Aedes aegypti) 성충에 대한 EO-퍼메트린 혼합물의 생물검정을 수행하여 상승작용을 규명하였다.
GC-MS 분석법을 이용한 화학적 특성 분석 결과, C. rotundus, A. galanga, C. verum의 EO에서 각각 48종의 화합물이 확인되었으며, 이는 전체 성분의 80.22%, 86.75%, 97.24%를 차지하는 것으로 나타났습니다. Cyperene(14.04%), β-bisabolene(18.27%), cinnamaldehyde(64.66%)는 각각 cyperus 오일, galangal 오일, 그리고 발사믹 오일의 주요 성분입니다. 생물학적 성충 사멸 검정에서 C. rotundus, A. galanga, 그리고 C. verum의 EV는 Ae. 를 효과적으로 사멸시켰습니다. aegypti, MCM-S 및 PMD-R의 LD50 값은 각각 암컷 10.05 및 9.57 μg/mg, 암컷 7.97 및 7.94 μg/mg, 암컷 3.30 및 3.22 μg/mg였습니다. 이러한 EO에서 MCM-S 및 PMD-R Ae의 성충 살충 효율은 피페로닐 부톡사이드(PBO 값, LD50 = 암컷 6.30 및 4.79 μg/mg)와 유사했지만, 페르메트린(LD50 값 = 암컷 0.44 및 3.70 ng/mg)만큼 뚜렷하지는 않았습니다. 그러나 병용 생물검정에서 EO와 페르메트린 간에 시너지 효과가 확인되었습니다. 두 종류의 이집트숲모기에 대해 페르메트린과 유의미한 시너지 효과가 나타났습니다. C. rotundus와 A. galanga의 전자현미경(EM)에서 이집트숲모기(Aedes aegypti)가 관찰되었습니다. C. rotundus와 A. galanga 오일을 첨가한 결과, MCM-S에서 퍼메트린의 LD50 값이 암컷에서 각각 0.44에서 0.07 ng/mg, 0.11 ng/mg으로 유의하게 감소했으며, 시너지 비율(SR) 값은 각각 6.28과 4.00이었습니다. 또한, C. rotundus와 A. galanga 오일을 첨가한 PMD-R에서도 퍼메트린의 LD50 값이 암컷에서 각각 3.70에서 0.42 ng/mg, 0.003 ng/mg으로 유의하게 감소했으며, 시너지 비율 값은 각각 8.81과 1233.33이었습니다.
두 종류의 이집트숲모기에 대한 성충 독성을 강화하는 EO-퍼메트린 조합의 시너지 효과. 이집트숲모기는 모기 방제 효능을 향상시키는 시너지제로서 에틸렌 옥사이드의 유망한 역할을 보여주며, 특히 기존 화합물이 효과가 없거나 부적절한 경우 더욱 그렇습니다.
이집트숲모기(Diptera: Culicidae)는 뎅기열과 황열병, 치쿤구니아, 지카 바이러스와 같은 다른 전염성 바이러스 질병의 주요 매개체로, 인간에게 엄청나고 지속적인 위협을 가하고 있습니다[1, 2]. 뎅기열 바이러스는 인간에게 영향을 미치는 가장 심각한 병원성 출혈열로, 매년 약 500만~1억 건이 발생하고 전 세계적으로 25억 명 이상이 위험에 처해 있습니다[3]. 이 전염병의 발병은 대부분 열대 국가의 인구, 보건 시스템 및 경제에 막대한 부담을 줍니다[1]. 태국 보건부에 따르면 2015년 전국적으로 뎅기열 발병 사례가 142,925건, 사망자가 141명으로 보고되었으며, 이는 2014년 발병 사례 및 사망자 수의 3배가 넘습니다[4]. 역사적 증거에도 불구하고 뎅기열은 이집트숲모기에 의해 근절되었거나 크게 감소했습니다. 이집트숲모기[5]를 통제한 후 감염률이 극적으로 증가했고 이 질병은 수십 년간의 지구 온난화로 인해 전 세계로 퍼졌습니다. 이집트숲모기의 박멸 및 통제는 낮 동안 인간 거주지와 그 주변에서 짝짓기, 먹이 섭취, 휴식 및 알을 낳는 가내 모기 매개체이기 때문에 비교적 어렵습니다. 또한 이 모기는 자연 현상(가뭄 등)이나 인간의 통제 조치로 인한 환경 변화나 교란에 적응하는 능력이 있으며 원래 개체 수로 돌아갈 수 있습니다[6, 7]. 뎅기열에 대한 백신은 최근에야 승인되었고 뎅기열에 대한 특정 치료법이 없기 때문에 뎅기열 전염 위험을 예방하고 줄이는 것은 전적으로 모기 매개체를 통제하고 매개체와 인간의 접촉을 없애는 데 달려 있습니다.
특히, 모기 방제를 위한 화학물질의 사용은 이제 포괄적인 통합 매개체 관리의 중요한 구성 요소로서 공중 보건에서 중요한 역할을 합니다. 가장 널리 사용되는 화학적 방법에는 모기 유충(살충제)과 성충 모기(아디도시드)에 작용하는 저독성 살충제를 사용하는 것이 포함됩니다. 공급원 감소와 유기인산염 및 곤충 성장 조절제와 같은 화학적 살충제의 정기적인 사용을 통한 유충 방제가 중요한 것으로 간주됩니다. 그러나 합성 살충제와 관련된 부정적인 환경 영향과 노동 집약적이고 복잡한 유지 관리는 여전히 주요 관심사로 남아 있습니다[8, 9]. 성충 방제와 같은 전통적인 활성 매개체 방제는 감염성 질병 매개체를 신속하고 대규모로 근절할 수 있을 뿐만 아니라 지역 매개체 개체군의 수명과 수명을 줄일 수 있기 때문에 바이러스 발생 중에 가장 효과적인 방제 수단으로 남아 있습니다[3]., 10]. 네 가지 화학 살충제 계열, 즉 유기염소계(DDT로만 지칭), 유기인계 살충제, 카바메이트계 살충제, 피레트로이드계 살충제가 매개체 방제 프로그램의 기반을 형성하며, 피레트로이드계 살충제가 가장 성공적인 계열로 간주됩니다. 이 살충제들은 다양한 절지동물에 매우 효과적이지만 포유류에게는 독성이 낮습니다. 현재 합성 피레트로이드계 살충제가 상업용 살충제의 대부분을 차지하며, 전 세계 살충제 시장의 약 25%를 차지합니다[11, 12]. 페르메트린과 델타메트린은 광범위 피레트로이드 살충제로, 수십 년 동안 전 세계적으로 농업 및 의료적으로 중요한 다양한 해충을 방제하는 데 사용되어 왔습니다[13, 14]. 1950년대에 DDT는 태국의 국가 공중 보건 모기 방제 프로그램의 주요 화학물질로 선정되었습니다. 말라리아가 만연한 지역에서 DDT가 널리 사용되자 태국은 1995년과 2000년 사이에 DDT 사용을 단계적으로 중단하고 이를 두 가지 피레트로이드계 물질인 페르메트린과 델타메트린으로 대체했습니다[15, 16]. 이러한 피레트로이드계 살충제는 1990년대 초 말라리아와 뎅기열을 방제하기 위해 도입되었으며, 주로 모기장 처리와 열 안개, 초저독성 살포를 통해 사용되었습니다[14, 17]. 그러나 모기의 강한 저항성과 공중 보건 및 합성 화학 물질의 환경 영향에 대한 우려로 인한 대중의 준수 부족으로 효과가 사라졌습니다. 이는 위협 벡터 방제 프로그램의 성공에 상당한 어려움을 야기합니다[14, 18, 19]. 전략을 더욱 효과적으로 만들기 위해서는 시기적절하고 적절한 대책이 필요합니다. 권장되는 관리 절차로는 천연 물질 대체, 이종 화학물질 순환, 시너지제 첨가, 그리고 화학물질 혼합 또는 이종 화학물질 동시 적용 등이 있다[14, 20, 21]. 따라서 친환경적이고 편리하며 효과적인 대안 및 시너지제를 찾고 개발하는 것이 시급하며, 본 연구는 이러한 필요성을 해결하는 것을 목표로 한다.
자연적으로 유래된 살충제, 특히 식물 성분을 기반으로 한 살충제는 현재 및 미래의 모기 구제 대안을 평가하는 데 잠재력이 있는 것으로 나타났습니다[22, 23, 24]. 여러 연구에서 식물성 제품, 특히 에센셜 오일(EO)을 성충 살충제로 사용하여 중요한 모기 매개체를 구제할 수 있음이 밝혀졌습니다. 셀러리, 커민, 제도아리아, 아니스, 파이프 페퍼, 타임, Schinus terebinthifolia, Cymbopogon citratus, Cymbopogon schoenanthus, Cymbopogon giganteus, Chenopodium ambrosioides, Cochlospermum planchonii, Eucalyptus ter eticornis, Eucalyptus citriodora, Cananga odorata 및 Petroselinum Criscum과 같은 많은 식물성 오일에서 일부 중요한 모기 종에 대한 성충 살충 특성이 발견되었습니다[25,26,27,28,29,30]. 에틸렌 옥사이드는 현재 단독으로 사용될 뿐만 아니라 추출된 식물 물질이나 기존 합성 살충제와 병용하여 다양한 정도의 독성을 나타냅니다. 유기인산염, 카바메이트, 피레트로이드와 같은 기존 살충제와 에틸렌 옥사이드/식물 추출물의 병용은 독성 효과에 있어 상승작용 또는 길항작용을 나타내며 질병 매개체와 해충에 효과적인 것으로 나타났습니다[31,32,33,34,35]. 그러나 식물 화학 물질과 합성 화학 물질의 병용 또는 비병용의 상승작용 독성 효과에 대한 대부분의 연구는 의학적으로 중요한 모기보다는 농업 곤충 매개체와 해충에 대해 수행되었습니다. 더욱이, 모기 매개체에 대한 식물-합성 살충제 병용의 상승작용 효과에 대한 대부분의 연구는 유충 살충 효과에 초점을 맞추었습니다.
영어: 태국의 토착 식물에서 살충제를 선별하는 진행 중인 연구 프로젝트의 일환으로 저자가 수행한 이전 연구에서 Cyperus rotundus, 갈랑갈 및 계피에서 추출한 에틸렌 옥사이드가 성충 이집트숲모기에 대해 잠재적인 활성이 있는 것으로 밝혀졌습니다[36]. 따라서 이 연구는 피레트로이드 저항성 및 민감성 균주를 포함하여 이집트숲모기에 대한 이러한 약용 식물에서 분리한 EO의 효과를 평가하는 것을 목표로 했습니다. 성충에게 좋은 효능을 보이는 에틸렌 옥사이드와 합성 피레트로이드의 이진 혼합물의 상승 효과는 전통적인 살충제 사용을 줄이고 모기 매개체, 특히 이집트숲모기에 대한 저항성을 증가시키는 것으로 분석되었습니다. 이 논문에서는 효과적인 에센셜 오일의 화학적 특성과 이집트숲모기에 대한 합성 페르메트린의 독성을 증가시킬 수 있는 잠재력을 보고합니다. 피레트로이드에 민감한 균주(MCM-S)와 내성 균주(PMD-R)의 aegypti.
정유 추출에 사용된 C. rotundus와 A. galanga의 뿌리줄기와 C. verum의 나무껍질(그림 1)은 태국 치앙마이 주의 약초 공급업체에서 구입했습니다. 이 식물들의 과학적 동정은 태국 치앙마이 주 치앙마이 대학교(CMU) 이과대학 생물학과의 식물표본학자인 James Franklin Maxwell 씨와 카네기 멜론 대학교 약학대학 약학과의 Wannari Charoensap 과학자와의 협의를 통해 이루어졌습니다. 각 식물의 표본은 향후 활용을 위해 카네기 멜론 대학교 의과대학 기생충학과에 보관되어 있습니다.
식물 샘플은 천연 에센셜 오일(EO)을 추출하기 전에 수분 함량을 제거하기 위해 활성 통풍과 약 30 ± 5 °C의 주변 온도가 있는 열린 공간에서 3~5일 동안 개별적으로 그늘에서 건조했습니다.각 건조된 식물 재료 250g을 기계적으로 거친 분말로 분쇄하고 수증기 증류를 통해 에센셜 오일(EO)을 분리하는 데 사용했습니다.증류 장치는 전기 가열 맨틀, 3000mL 둥근 바닥 플라스크, 추출 컬럼, 응축기 및 Cool ace 장치(Eyela Cool Ace CA-1112 CE, Tokyo Rikakikai Co. Ltd., Tokyo, Japan)로 구성되었습니다.1600ml의 증류수와 10~15개의 유리 비드를 플라스크에 넣은 다음 증류가 완료되고 더 이상 EO가 생성되지 않을 때까지 최소 3시간 동안 전기 히터를 사용하여 약 100°C로 가열했습니다. 분리깔대기를 사용하여 EO 층을 수상으로부터 분리하고, 무수황산나트륨(Na2SO4)으로 건조한 후, 화학적 구성과 성충의 활동을 검사할 때까지 4°C에서 밀폐된 갈색 병에 보관했습니다.
에센셜 오일의 화학적 조성은 성인 물질에 대한 생물 검정과 동시에 수행되었다. 정성 분석은 단일 사중극자 질량 선택 검출기(Agilent Technologies, Wilmington, CA, USA)와 MSD 5975C(EI)를 장착한 Hewlett-Packard(Wilmington, CA, USA) 7890A 가스 크로마토그래피(Agilent Technologies)로 구성된 GC-MS 시스템을 사용하여 수행되었다.
크로마토그래피 컬럼 - DB-5MS(30m × ID 0.25mm × 필름 두께 0.25µm). 총 GC-MS 실행 시간은 20분이었습니다. 분석 조건은 주입기와 이송 라인 온도가 각각 250과 280°C이고, 퍼니스 온도가 50°C에서 250°C까지 10°C/분의 속도로 증가하도록 설정되고, 운반 가스는 헬륨입니다. 유속은 1.0ml/분입니다. 주입량은 0.2µL(CH2Cl2에서 부피 기준 1/10%, 분할 비율 100:1)입니다. GC-MS 검출에는 이온화 에너지가 70eV인 전자 이온화 시스템이 사용됩니다. 획득 범위는 50~550 원자 질량 단위(amu)이고 스캐닝 속도는 초당 2.91 스캔입니다. 성분의 상대적 백분율은 피크 면적으로 정규화된 백분율로 표시됩니다. EO 성분의 식별은 보유 지수(RI)를 기반으로 합니다. RI는 n-알칸 계열(C8-C40)에 대해 Van den Dool과 Kratz의 방정식[37]을 사용하여 계산하고, 문헌[38] 및 도서관 데이터베이스(NIST 2008 및 Wiley 8NO8)의 보유 지수와 비교했습니다. 표시된 화합물의 구조 및 분자식과 같은 동일성은 실제 시료와 비교하여 확인했습니다.
합성 퍼메트린과 피페로닐 부톡사이드(PBO, 시너지 연구에서 양성 대조군)의 분석 표준물질은 Sigma-Aldrich(미국 미주리주 세인트루이스 소재)에서 구입했습니다. 세계보건기구(WHO) 성인용 검사 키트와 퍼메트린 함침지(0.75%) 진단용 용량은 말레이시아 페낭에 있는 WHO 벡터 관리 센터에서 구입했습니다. 사용된 다른 모든 화학물질과 시약은 분석 등급이며 태국 치앙마이 주의 현지 기관에서 구입했습니다.
성충 생물 검정에서 시험 생물로 사용된 모기는 실험실에서 자유롭게 교미하는 이집트숲모기(Aedes mosquitoes)였으며, 감수성인 Muang Chiang Mai 균주(MCM-S)와 내성인 Pang Mai Dang 균주(PMD-R)를 포함했습니다. 균주 MCM-S는 태국 치앙마이 주, Muang Chiang Mai 지역에서 수집한 현지 샘플에서 얻었으며 1995년부터 CMU 의과대학 기생충학과의 곤충학실에서 보관하고 있습니다[39]. 페르메트린에 내성이 있는 것으로 밝혀진 PMD-R 균주는 태국 치앙마이 주, Mae Tang 구, Ban Pang Mai Dang에서 처음 수집한 야외 모기에서 분리했으며 1997년부터 같은 연구소에서 보관하고 있습니다[40]. PMD-R 균주는 WHO 검출 키트를 약간 수정하여 0.75% 페르메트린에 간헐적으로 노출시켜 내성 수준을 유지하기 위해 선택적 압력 하에서 배양했습니다[41]. Ae. Aedes aegypti의 각 균주는 병원균이 없는 실험실에서 25±2°C, 상대 습도 80±10%, 그리고 14:10시간의 명암 광주기를 조건으로 개별적으로 배양했습니다. 약 200마리의 유충을 플라스틱 트레이(길이 33cm, 너비 28cm, 높이 9cm)에 수돗물을 채웠고 트레이당 유충 150~200마리씩 넣었으며 살균된 개 비스킷을 하루 두 번 먹였습니다. 성충은 습한 케이지에 넣고 10% 수크로스 수용액과 10% 종합 비타민 시럽 용액을 지속적으로 먹였습니다. 암컷 모기는 정기적으로 피를 빨아 알을 낳습니다. 혈액을 섭취하지 않은 생후 2~5일 된 암컷은 실험적 성충 생물학적 분석에 지속적으로 사용할 수 있습니다.
EO의 용량-사망률 반응 생물 검정은 WHO 감수성 시험 표준 프로토콜에 따라 수정된 국소 방법을 사용하여 성충 암컷 Aedes 모기, aegypti, MCM-S 및 PMD-R에서 수행되었습니다[42]. 각 식물의 EO는 적절한 용매(예: 에탄올 또는 아세톤)로 연속 희석하여 4-6 농도의 점진적 시리즈를 얻었습니다. 이산화탄소(CO2)로 마취한 후 모기를 개별적으로 무게를 측정했습니다. 마취된 모기는 절차 중 재활성화를 방지하기 위해 입체 현미경 아래 맞춤형 냉각판 위의 마른 여과지 위에 움직이지 않게 두었습니다. 각 처리에 대해 0.1 μl의 EO 용액을 Hamilton 휴대용 마이크로 디스펜서(700 Series Microliter™, Hamilton Company, Reno, NV, USA)를 사용하여 암컷의 상부 전흉부에 적용했습니다. 각 농도로 암컷 25마리를 처리하였으며, 최소 4가지 농도에서 사망률은 10%에서 95%까지 다양했습니다. 용매로 처리한 모기는 대조군으로 사용했습니다. 시험 샘플의 오염을 방지하기 위해, 시험한 각 EO에 대해 여과지를 새 여과지로 교체하십시오. 이러한 생물 검정에 사용된 용량은 살아있는 암컷 체중 1밀리그램당 EO의 마이크로그램으로 표시됩니다. 성충 PBO 활동도 EO와 유사한 방식으로 평가했으며, 상승작용 실험에서는 PBO를 양성 대조군으로 사용했습니다. 모든 그룹의 처리된 모기를 플라스틱 컵에 넣고 10% 수크로스와 10% 종합 비타민 시럽을 투여했습니다. 모든 생물 검정은 25±2°C, 80±10% 상대 습도에서 수행했으며 대조군과 함께 4회 반복했습니다. 24시간 사육 기간 동안의 사망률은 모기가 기계적 자극에 반응하지 않는 것으로 확인하여 확인한 다음 4회 반복의 평균을 기준으로 기록했습니다. 각 시험 샘플에 대해 서로 다른 모기 배치를 사용하여 실험 처리를 4회 반복했습니다. 결과를 요약하여 사망률을 계산하고, 이를 프로빗 분석을 통해 24시간 치사량을 결정하는 데 사용했습니다.
EO와 페르메트린의 상승적 살충 효과는 이전에 설명한 바와 같이 국소 독성 분석 절차[42]를 사용하여 평가했습니다. 용매로 아세톤이나 에탄올을 사용하여 원하는 농도의 페르메트린을 제조하고 EO와 페르메트린의 이진 혼합물(EO-페르메트린: LD25 농도의 EO와 혼합한 페르메트린)을 사용했습니다. 테스트 키트(페르메트린과 EO-페르메트린)를 Ae. Aedes aegypti의 MCM-S 및 PMD-R 균주에 대해 평가했습니다. 25마리의 암컷 모기 각각에게 페르메트린을 4회 투여하여 성충을 죽이는 효과를 테스트했으며 각 처리를 4회 반복했습니다. 후보 EO 상승제를 확인하기 위해 25마리의 암컷 모기 각각에게 EO-페르메트린을 4~6회 투여했으며 각 처리를 4회 반복했습니다. PBO-페르메트린 처리(PBO의 LD25 농도와 혼합한 페르메트린)도 양성 대조군으로 사용했습니다. 이 생물 검정에 사용된 용량은 살아있는 암컷 체중 밀리그램당 시험 시료의 나노그램 단위로 표시됩니다. 각 모기 균주에 대해 개별적으로 사육된 배치에서 네 번의 실험 평가를 수행했으며, 사망률 데이터를 모아 Probit을 사용하여 24시간 치사량을 분석했습니다.
사망률은 Abbott 공식[43]을 사용하여 보정했습니다. 보정된 데이터는 SPSS(버전 19.0)를 사용하여 Probit 회귀 분석을 통해 분석했습니다. 25%, 50%, 90%, 95%, 99%(각각 LD25, LD50, LD90, LD95, LD99)의 치사율은 해당 95% 신뢰구간(95% CI)을 사용하여 계산했습니다. 유의성 측정 및 검정 표본 간 차이는 각 생물학적 검정에서 카이제곱 검정 또는 Mann-Whitney U 검정을 사용하여 평가했습니다. 결과는 P에서 통계적으로 유의한 것으로 간주했습니다.< 0.05. 저항 계수(RR)는 다음 공식을 사용하여 LD50 수준에서 추정됩니다[12].
RR > 1은 저항성을, RR ≤ 1은 민감성을 나타냅니다. 각 시너지 후보의 시너지 비율(SR) 값은 다음과 같이 계산됩니다[34, 35, 44].
이 요인은 결과를 세 가지 범주로 나눕니다.SR 값 1±0.05는 뚜렷한 효과가 없는 것으로 간주되고, SR 값 >1.05는 상승 효과가 있는 것으로 간주되며, SR 값 >1.05는 상승 효과가 있는 것으로 간주됩니다.밝은 노란색 액체 오일은 C. rotundus와 A. galanga의 뿌리줄기와 C. verum의 나무껍질을 수증기 증류하여 얻을 수 있습니다.건조 중량으로 계산된 수율은 각각 0.15%, 0.27%(w/w), 0.54%(v/v)였습니다(표 1).C. rotundus, A. galanga 및 C. verum 오일의 화학적 조성에 대한 GC-MS 연구는 19개, 17개 및 21개의 화합물이 존재함을 보여주었으며, 이는 각각 전체 성분의 80.22%, 86.75% 및 97.24%를 차지했습니다(표 2). 갈랑갈(C. lucidum) 근경 오일 화합물은 주로 시페로넨(14.04%)으로 구성되며, 그 다음으로 카랄렌(9.57%), α-캡셀란(7.97%), α-캡셀란(7.53%) 순입니다. 갈랑갈 근경 오일의 주요 화학 성분은 β-비스아볼렌(18.27%)이며, 그 다음으로 α-베르가모텐(16.28%), 1,8-시네올(10.17%), 피페로놀(10.09%) 순입니다. 갈랑갈(C. verum) 수피 오일의 주성분은 신남알데하이드(64.66%)인 반면, 신남아세테이트(6.61%), α-코파엔(5.83%), 3-페닐프로피온알데하이드(4.09%)는 미량 성분으로 간주되었습니다. 그림 2에서 볼 수 있듯이, 시페른, β-비사볼렌 및 신나말데히드의 화학 구조는 각각 C. rotundus, A. galanga 및 C. verum의 주요 화합물입니다.
세 가지 OO에서 성충의 Aedes 모기에 대한 활동을 평가한 결과가 표 3에 나와 있습니다. 모든 EO는 다른 유형과 용량에서 MCM-S Aedes 모기에 치명적인 효과가 있는 것으로 나타났습니다. Aedes aegypti. 가장 효과적인 EO는 C. verum이고 그 다음으로 A. galanga와 C. rotundus로 LD50 값이 각각 3.30, 7.97 및 10.05μg/mg MCM-S 암컷으로 여성의 3.22(U = 1), Z = -0.775, P = 0.667), 7.94(U = 2, Z = 0, P = 1) 및 9.57(U = 0, Z = -1.549, P = 0.333)μg/mg PMD -R보다 약간 높습니다. 영어: 이것은 PBO가 MSM-S 균주보다 PMD-R에 대해 약간 더 높은 성충 효과를 갖는 것과 일치하며, LD50 값은 각각 4.79 및 6.30 μg/mg 암컷입니다(U = 0, Z = -2.021, P = 0.057). C. verum, A. galanga, C. rotundus 및 PBO의 PMD-R에 대한 LD50 값은 각각 MCM-S에 대한 값보다 약 0.98, 0.99, 0.95 및 0.76배 낮다고 계산할 수 있습니다. 따라서 이는 두 Aedes 균주 간에 PBO 및 EO에 대한 감수성이 비교적 유사함을 나타냅니다. PMD-R이 MCM-S보다 감수성이 높았지만 Aedes aegypti의 감수성은 유의하지 않았습니다. 이와 대조적으로 두 Aedes 균주는 permethrin. aegypti에 대한 감수성에서 크게 달랐습니다(표 4). PMD-R은 퍼메트린에 대해 유의미한 내성을 보였으며(여성에서 LD50 값 = 0.44 ng/mg), MCM-S(여성에서 LD50 값 = 0.44 ng/mg)보다 LD50 값이 3.70으로 더 높았습니다(U = 0, Z = -2.309, P = 0.029). PMD-R은 MCM-S보다 퍼메트린에 대한 민감도는 훨씬 낮지만, PBO와 C. verum, A. galanga, C. rotundus 오일에 대한 민감도는 MCM-S보다 약간 높습니다.
EO-페르메트린 조합의 성충 개체군 생물 검정에서 관찰된 바와 같이, 페르메트린과 EO의 이성 혼합물(LD25)은 시너지 효과(SR 값 > 1.05)를 보이거나 효과가 없는(SR 값 = 1 ± 0.05) 결과를 보였다. EO-페르메트린 혼합물이 실험용 알비노 모기에 미치는 복합적인 성충 효과. 이집트숲모기(Aedes aegypti) 균주 MCM-S와 PMD-R은 표 4와 그림 3에 제시되어 있다. C. verum 오일을 첨가하면 MCM-S에 대한 페르메트린의 LD50이 여성의 경우 0.44~0.42 ng/mg, PMD-R에 대한 LD50이 여성의 경우 3.70에서 3.85 ng/mg으로 각각 약간 감소하는 것으로 나타났다. 대조적으로, C. rotundus와 A. galanga 오일을 첨가하면 MCM-S에서 퍼메트린의 LD50이 0.44에서 0.07(U = 0, Z = -2.309, P = 0.029) 및 0.11(U = 0, Z) = -2.309, P = 0.029) ng/mg 여성으로 유의하게 감소했습니다. MCM-S의 LD50 값을 기준으로, C. rotundus와 A. galanga 오일을 첨가한 후 EO-퍼메트린 혼합물의 SR 값은 각각 6.28과 4.00이었습니다. 따라서 PMD-R에 대한 페르메트린의 LD50은 3.70에서 0.42(U = 0, Z = -2.309, P = 0.029)로 유의하게 감소하였고, C. rotundus와 A. galanga 오일을 첨가한 경우(U = 0, Z = -2.337, P = 0.029) 0.003으로 암컷 mg당 유의하게 감소하였다. C. rotundus와 페르메트린을 병용 투여한 경우의 PMD-R에 대한 SR 값은 8.81이었고, 갈랑갈-페르메트린 혼합물의 SR 값은 1233.33이었다. MCM-S에 비해 양성 대조군인 PBO의 LD50 값은 0.44에서 0.26 ng/mg(암컷)으로, 3.70 ng/mg(암컷)에서 0.65 ng/mg(U = 0, Z = -2.309, P = 0.029) 및 PMD-R(U = 0, Z = -2.309, P = 0.029)로 감소했습니다. MCM-S 및 PMD-R 균주에 대한 PBO-페르메트린 혼합물의 SR 값은 각각 1.69 및 5.69였습니다. 이러한 결과는 C. rotundus 및 A. galanga 오일과 PBO가 MCM-S 및 PMD-R 균주에 대해 C. verum 오일보다 페르메트린 독성을 더 크게 증가시킨다는 것을 나타냅니다.
EO, PBO, 페르메트린(PE) 및 이들의 조합이 피레트로이드 감수성(MCM-S) 및 내성(PMD-R)을 가진 이집트숲모기(Aedes aegypti)에 미치는 성충 활성(LD50)
[45]. 합성 피레트로이드는 전 세계적으로 농업 및 의학적으로 중요한 거의 모든 절지동물을 방제하는 데 사용됩니다. 그러나 합성 살충제 사용의 유해한 결과, 특히 모기의 발달 및 광범위한 내성, 장기적인 건강 및 환경에 미치는 영향으로 인해 이제 전통적인 합성 살충제 사용을 줄이고 대체제를 개발해야 할 시급한 필요성이 있습니다[35, 46, 47]. 환경과 인간 건강을 보호하는 것 외에도 식물성 살충제의 장점으로는 높은 선택성, 전 세계적 가용성, 생산 및 사용의 용이성이 있어 모기 방제에 더욱 매력적입니다[32,48, 49]. 이 연구에서는 GC-MS 분석을 통해 효과적인 에센셜 오일의 화학적 특성을 밝히는 것 외에도 성인 에센셜 오일의 효능과 합성 페르메트린의 독성을 증가시키는 능력을 평가했습니다. 피레트로이드에 민감한 균주(MCM-S)와 내성 균주(PMD-R)의 aegypti.
GC-MS 특성 분석 결과, 시페른(14.04%), β-비사볼렌(18.27%) 및 신나말데히드(64.66%)가 각각 C. rotundus, A. galanga 및 C. verum 오일의 주요 성분인 것으로 나타났습니다. 이러한 화학 물질은 다양한 생물학적 활성을 보였습니다. Ahn et al. [50]은 C. rotundus의 뿌리줄기에서 분리한 6-아세톡시시페렌이 항종양 화합물로 작용하여 난소암 세포에서 카스파제 의존성 세포사멸을 유도할 수 있다고 보고했습니다. 몰약나무의 정유에서 추출한 β-비사볼렌은 시험관 내 및 생체 내 모두에서 인간 및 마우스 유방 종양 세포에 대해 특이적인 세포독성을 나타냅니다[51]. 천연 추출물 또는 실험실에서 합성된 시나말데히드는 살충, 항균, 항진균, 항염, 면역 조절, 항암 및 항혈관 생성 활동을 갖는 것으로 보고되었습니다[52].
용량 의존적 성충 활동 생물 검정의 결과는 시험된 EO의 좋은 잠재력을 보여주었고, 이집트숲모기 균주 MCM-S와 PMD-R이 EO와 PBO에 유사한 감수성을 가지고 있음을 보여주었습니다. 이집트숲모기. EO와 페르메트린의 효과를 비교한 결과, 후자가 더 강한 알레르기 효과를 가지는 것으로 나타났습니다. LD50 값은 암컷에서 각각 균주 MCM-S와 PMD-R의 경우 0.44와 3.70 ng/mg입니다. 이러한 결과는 자연적으로 발생하는 살충제, 특히 식물 유래 제품이 일반적으로 합성 물질보다 효과가 떨어진다는 것을 보여주는 많은 연구에 의해 뒷받침됩니다[31, 34, 35, 53, 54]. 이는 전자가 활성 또는 비활성 성분의 복잡한 조합인 반면 후자는 정제된 단일 활성 화합물이기 때문일 수 있습니다. 그러나 작용 기전이 다른 천연 활성 성분의 다양성과 복잡성은 생물학적 활성을 증가시키거나 숙주 집단의 내성 발달을 방해할 수 있습니다[55, 56, 57]. 많은 연구자들이 C. verum, A. galanga, C. rotundus 및 이들의 성분인 β-bisabolene, cinnamaldehyde, 1,8-cineole의 모기 방제 잠재력을 보고했습니다[22, 36, 58, 59, 60,61, 62,63, 64]. 그러나 문헌 검토 결과, Aedes 모기에 대한 페르메트린이나 다른 합성 살충제와의 상승 효과에 대한 이전 보고는 없었습니다.
이 연구에서 두 Aedes 균주 간에 페르메트린 감수성에 유의한 차이가 관찰되었습니다.Aedes aegypti. MCM-S는 페르메트린에 민감한 반면 PMD-R은 훨씬 덜 민감하여 내성률이 8.41입니다.MCM-S의 민감도와 비교했을 때 PMD-R은 페르메트린에 덜 민감하지만 EO에 더 민감하여 페르메트린을 EO와 결합하여 효과를 높이기 위한 추가 연구의 기초를 제공합니다.성충 효과에 대한 상승적 조합 기반 생물 검정은 EO와 페르메트린의 이성 혼합물이 성충 Aedes의 사망률을 감소시키거나 증가시키는 것으로 나타났습니다.Aedes aegypti. C. verum 오일을 첨가하면 MCM-S에 대한 페르메트린의 LD50이 약간 감소했지만 PMD-R에 대한 LD50은 각각 SR 값이 1.05와 0.96으로 약간 증가했습니다. 이는 C. verum 오일이 MCM-S 및 PMD-R에서 테스트했을 때 페르메트린에 대해 상승작용 또는 길항작용이 없음을 나타냅니다.반대로 C. rotundus 및 A. galanga 오일은 MCM-S 또는 PMD-R에서 페르메트린의 LD50 값을 크게 감소시켜 상당한 상승작용 효과를 보였습니다.페르메트린을 C. rotundus 및 A. galanga의 EO와 결합했을 때 MCM-S에 대한 EO-페르메트린 혼합물의 SR 값은 각각 6.28 및 4.00이었습니다.또한 페르메트린을 C. rotundus(SR = 8.81) 또는 A. galanga(SR = 1233.33)와 함께 PMD-R에 대해 평가했을 때 SR 값이 크게 증가했습니다.C. rotundus와 A. galanga 모두 PMD-R Ae에 대한 페르메트린의 독성을 증가시켰다는 점은 주목할 가치가 있습니다. aegypti에 유의미한 영향을 미치는 것으로 나타났습니다. 마찬가지로, PBO는 MCM-S와 PMD-R 균주에 대해 각각 1.69와 5.69의 SR 값을 나타내어 퍼메트린의 독성을 증가시키는 것으로 나타났습니다. C. rotundus와 A. galanga는 가장 높은 SR 값을 보였으므로, 각각 MCM-S와 PMD-R에 대한 퍼메트린 독성을 증가시키는 데 가장 효과적인 상승작용제로 간주되었습니다.
여러 이전 연구에서 합성 살충제와 식물 추출물의 조합이 다양한 모기 종에 대해 상승 효과를 보인다고 보고했습니다. Kalayanasundaram과 Das가 연구한 Anopheles Stephensi에 대한 살충 생물 검정[65]은 광범위 유기인산염인 펜티온이 Cleodendron inerme, Pedalium murax 및 Parthenium hysterophorus와 관련이 있음을 보여주었습니다. 추출물 간에 상당한 상승 효과가 관찰되었으며 상승 효과(SF)는 각각 1.31, 1.38, 1.40, 1.48, 1.61 및 2.23이었습니다. 15종의 맹그로브 종에 대한 살충 스크리닝에서 맹그로브 줄기의 석유 에테르 추출물이 LC50 값이 25.7mg/L로 Culex quinquefasciatus에 가장 효과적인 것으로 나타났습니다[66]. 이 추출물과 식물성 살충제 피레트룸의 상승효과는 또한 C. quinquefasciatus 유충에 대한 피레트룸의 LC50을 0.132mg/L에서 0.107mg/L로 감소시키는 것으로 보고되었으며, 이 연구에서는 1.23의 SF 계산이 사용되었습니다. 34,35,44]. 솔라눔 시트론 뿌리 추출물과 여러 합성 살충제(예: 펜티온, 시페르메트린(합성 피레트로이드) 및 티메스포스(유기인계 살충제))의 아노펠레스 모기에 대한 결합 효과를 평가했습니다. Stephensi [54] 및 C. quinquefasciatus [34]. 시페르메트린과 노란색 과일 석유 에테르 추출물을 함께 사용하면 모든 비율에서 시페르메트린에 상승효과가 나타났습니다. 가장 효과적인 비율은 An. Stephen West[54]에 비해 LC50 및 SF 값이 각각 0.0054ppm 및 6.83인 1:1 이진 조합이었습니다. S. xanthocarpum과 temephos의 1:1 이진 혼합물은 길항적(SF = 0.6406)인 반면, S. xanthocarpum-fenthion 조합(1:1)은 SF가 1.3125인 C. quinquefasciatus에 대해 상승 작용을 나타냈습니다[34]]. Tong과 Blomquist[35]는 식물 에틸렌 옥사이드가 Aedes 모기에 대한 카바릴(광범위 카바메이트) 및 페르메트린의 독성에 미치는 영향을 연구했습니다. Aedes aegypti. 결과는 한천, 후추, 주니퍼, 헬리크리섬, 백단향, 참깨에서 추출한 에틸렌 옥사이드가 이집트숲모기에 대한 카바릴의 독성을 증가시키는 것으로 나타났습니다. 이집트숲모기 유충의 SR 값은 1.0에서 7.0까지 다양했습니다. 반면, EO는 이집트숲모기 성충에 독성을 나타내지 않았습니다. 현재까지 이집트숲모기와 EO-카바릴의 병용에 대한 상승 효과는 보고되지 않았습니다. PBO는 이집트숲모기에 대한 카바릴의 독성을 증가시키기 위한 양성 대조군으로 사용되었습니다. 이집트숲모기 유충과 성충의 SR 값은 각각 4.9-9.5와 2.3입니다. 유충 살충 활성은 퍼메트린과 EO 또는 PBO의 이원 혼합물만 시험했습니다. EO-페르메트린 혼합물은 길항 효과가 있는 반면, PBO-페르메트린 혼합물은 이집트숲모기에 대해 상승 효과를 나타냈습니다.이집트숲모기 유충.그러나 PBO-페르메트린 혼합물에 대한 용량 반응 실험 및 SR 평가는 아직 수행되지 않았습니다.모기 매개체에 대한 식물 합성 조합의 상승 효과에 대한 결과는 거의 없었지만, 이러한 데이터는 기존 결과를 뒷받침하며, 적용된 용량을 줄일 뿐만 아니라 살충 효과를 높이기 위해 상승제를 추가할 가능성을 열어줍니다.곤충의 효율성.또한, 이 연구의 결과는 C. rotundus와 A. galanga 오일이 페르메트린 독성과 결합했을 때 PBO와 비교하여 피레스로이드에 민감한 이집트숲모기 균주 및 피레스로이드 내성 균주에 대해 상당히 높은 효능을 상승적으로 발휘한다는 것을 처음으로 보여주었습니다.이집트숲모기. 그러나 상승효과 분석 결과, 예상치 못한 결과에서 C. verum 오일이 두 가지 이집트숲모기(Aedes aegypti) 균주 모두에 대해 가장 강력한 항성충 효과를 나타냈습니다. 놀랍게도, 이집트숲모기에 대한 퍼메트린의 독성 효과는 만족스럽지 못했습니다. 독성 효과와 상승효과의 차이는 이러한 오일에 함유된 다양한 종류와 함량의 생리활성 성분에 노출되었기 때문일 수 있습니다.
효율 개선 방법을 이해하려는 노력에도 불구하고, 시너지 메커니즘은 여전히 불분명합니다. 효능과 시너지 잠재력의 차이에 대한 가능한 이유에는 테스트된 제품의 화학 조성의 차이와 저항성 상태 및 발달과 관련된 모기 감수성의 차이가 포함될 수 있습니다. 이 연구에서 테스트된 주요 에틸렌 옥사이드 성분과 미량 에틸렌 옥사이드 성분 사이에는 차이가 있으며, 이러한 화합물 중 일부는 다양한 해충 및 질병 매개체에 대해 기피 및 독성 효과가 있는 것으로 나타났습니다[61,62,64,67,68]. 그러나 C. rotundus, A. galanga 및 C. verum 오일에서 특징지어진 cypern, β-bisabolene 및 cinnamaldehyde와 같은 주요 화합물은 각각 Ae. aegypti에 대한 항성충 및 시너지 활성에 대해 이 논문에서 테스트되지 않았습니다. 따라서 각 에센셜 오일에 존재하는 활성 성분을 분리하고 이 모기 매개체에 대한 살충 효능 및 시너지 상호작용을 밝히기 위한 향후 연구가 필요합니다. 일반적으로 살충 활성은 독극물과 곤충 조직 사이의 작용 및 반응에 따라 달라지며, 이를 단순화하여 곤충 신체 피부 및 표적 기관 막으로의 침투, 활성화(= 표적과의 상호작용) 및 해독의 세 단계로 나눌 수 있습니다. 독성 물질[57, 69]. 따라서 독성 물질 조합의 효과 증가를 가져오는 살충제 상승작용에는 침투 증가, 축적된 화합물의 더 큰 활성화 또는 살충제 활성 성분의 해독 감소와 같은 이러한 범주 중 적어도 하나가 필요합니다. 예를 들어, 에너지 내성은 두꺼워진 큐티클을 통한 큐티클 침투를 지연시키고 일부 내성 곤충 균주에서 관찰되는 향상된 살충제 대사와 같은 생화학적 내성을 지연시킵니다[70, 71]. 특히 PMD-R에 대한 페르메트린의 독성을 증가시키는 데 있어 EO의 상당한 효과는 내성 메커니즘과 상호 작용하여 살충제 내성 문제에 대한 해결책을 나타낼 수 있습니다[57, 69, 70, 71]. Tong과 Blomquist[35]는 EO와 합성 살충제 간의 상승작용을 입증하여 이 연구 결과를 뒷받침했습니다. aegypti의 경우, 전통적인 살충제에 대한 내성 발달과 밀접하게 관련된 cytochrome P450 monooxygenases와 carboxylesterases를 포함한 해독 효소에 대한 저해 활성의 증거가 있습니다. PBO는 cytochrome P450 monooxygenase의 대사 억제제일 뿐만 아니라 상승작용 연구에서 양성 대조군으로 사용되어 입증된 바와 같이 살충제의 침투성을 향상시킵니다[35, 72]. 흥미롭게도, 갈랑갈 오일에서 발견되는 중요한 성분 중 하나인 1,8-cineole은 곤충 종에 대한 독성 효과로 알려져 있으며[22, 63, 73] 생물학적 활성 연구의 여러 영역에서 상승작용 효과가 있는 것으로 보고되었습니다[74]. . ,75,76,77]. 또한, 1,8-시네올은 쿠르쿠민[78], 5-플루오로우라실[79], 메페남산[80] 및 지도부딘[81]을 포함한 다양한 약물과 함께 시험관 내에서 투과 촉진 효과도 있습니다. 따라서, 1,8-시네올이 상승적 살충 작용에서 할 수 있는 역할은 활성 성분으로서 뿐만 아니라 침투 증강제로서의 역할도 있습니다. 특히 PMD-R에 대해 페르메트린과의 더 큰 상승 효과로 인해, 이 연구에서 관찰된 갈랑갈 오일과 트리코산테스 오일의 상승 효과는 저항 메커니즘과의 상호 작용, 즉 염소에 대한 투과성 증가에서 비롯될 수 있습니다. 피레트로이드는 축적된 화합물의 활성화를 증가시키고 시토크롬 P450 모노옥시게나제 및 카르복실에스테라제와 같은 해독 효소를 억제합니다. 그러나 이러한 측면은 상승적 메커니즘에서 EO와 그 분리된 화합물(단독 또는 병용)의 특정 역할을 밝히기 위해 추가 연구가 필요합니다.
1977년에 태국의 주요 매개체 개체군에서 페르메트린 내성 수준이 증가하는 것으로 보고되었고, 그 후 수십 년 동안 페르메트린의 사용은 다른 피레트로이드 화학 물질, 특히 델타메트린으로 대체된 것으로 대체되었습니다[82]. 그러나 델타메트린 및 기타 살충제 계열에 대한 매개체 내성은 과도하고 지속적인 사용으로 인해 전국적으로 매우 흔합니다[14, 17, 83, 84, 85, 86]. 이 문제를 해결하기 위해 페르메트린과 같이 이전에 효과적이었고 포유류에 대한 독성이 덜했던 폐기된 살충제를 순환시키거나 재사용하는 것이 좋습니다. 현재 최근 국가 정부 모기 구제 프로그램에서 페르메트린 사용이 감소했지만 모기 개체군에서 페르메트린 내성이 여전히 발견될 수 있습니다. 이는 모기가 주로 페르메트린과 다른 피레트로이드로 구성된 상업용 가정용 해충 구제 제품에 노출되었기 때문일 수 있습니다[14, 17]. 따라서 페르메트린의 성공적인 재활용에는 매개체 저항성을 줄이기 위한 전략의 개발 및 구현이 필요합니다. 이 연구에서 개별적으로 테스트한 에센셜 오일 중 페르메트린만큼 효과적인 것은 없었지만 페르메트린과 함께 사용하면 인상적인 상승 효과가 나타났습니다. 이는 EO와 저항성 메커니즘의 상호작용으로 인해 페르메트린과 EO의 조합이 살충제 또는 EO 단독보다 효과적이며, 특히 PMD-R Ae. Aedes aegypti에 효과적이라는 유망한 지표입니다. 매개체 제어를 위해 낮은 용량을 사용하더라도 효능을 높이는 상승적 혼합물의 이점은 저항성 관리를 개선하고 비용을 절감할 수 있습니다[33, 87]. 이러한 결과에서 A. galanga와 C. rotundus EO가 MCM-S 및 PMD-R 균주 모두에서 페르메트린 독성에 대한 상승 효과를 내는 데 있어 PBO보다 훨씬 더 효과적이었으며 기존의 에르고제닉 보조제에 대한 잠재적인 대안이라는 점은 주목할 만합니다.
선정된 EO는 PMD-R Ae. aegypti에 대한 성충 독성을 증가시키는 데 유의미한 상승 효과를 나타냈습니다. 특히 갈랑갈 오일의 SR 값은 최대 1233.33으로, EO가 퍼메트린의 효과를 향상시키는 상승제로서 광범위한 가능성을 시사합니다. 이는 새로운 활성 천연물의 사용을 촉진하여 고효율 모기 방제 제품의 사용을 증가시킬 수 있습니다. 또한, 에틸렌 옥사이드가 기존 모기 개체군의 내성 문제를 해결하기 위해 기존 살충제나 기존 살충제를 효과적으로 개선할 수 있는 대안적인 상승제로서의 잠재력을 보여줍니다. 모기 방제 프로그램에 쉽게 구할 수 있는 식물을 사용하는 것은 수입 및 고가의 자재에 대한 의존도를 줄일 뿐만 아니라, 공중 보건 시스템을 강화하기 위한 지역 사회의 노력을 촉진합니다.
이러한 결과는 에틸렌 옥사이드와 퍼메트린의 조합이 유의미한 시너지 효과를 발휘함을 명확히 보여줍니다. 이 결과는 모기 방제에서 에틸렌 옥사이드가 식물 시너지제로서 잠재력을 보여주며, 특히 내성 개체군에서 퍼메트린의 모기에 대한 효과를 증가시킵니다. 향후 개발 및 연구를 위해서는 갈랑갈 오일과 알피니아 오일 및 그 분리 화합물의 시너지 생물분석, 다양한 종과 단계의 모기에 대한 천연 또는 합성 살충제 조합, 그리고 비표적 생물에 대한 독성 시험이 필요할 것입니다. 에틸렌 옥사이드를 실용적인 대체 시너지제로 활용할 수 있을 것입니다.
세계보건기구. 2012-2020년 뎅기열 예방 및 통제를 위한 세계 전략. 제네바: 세계보건기구, 2012.
Weaver SC, Costa F., Garcia-Blanco MA, Ko AI, Ribeiro GS, Saade G., et al. Zika 바이러스: 역사, 출현, 생물학 및 통제 전망. 항바이러스 연구. 2016;130:69–80.
세계보건기구(WHO). 뎅기열 정보 자료. 2016. http://www.searo.who.int/entity/vector_borne_tropical_diseases/data/data_factsheet/en/. 접속일: 2017년 1월 20일
공중보건부. 태국 뎅기열 및 뎅기출혈열 발생 현황. 2016. http://www.m-society.go.th/article_attach/13996/17856.pdf. 접속일: 2017년 1월 6일
Ooi EE, Goh CT, Gabler DJ. 싱가포르에서 35년간 뎅기열 예방 및 매개체 방제. 급성감염병. 2006;12:887–93.
Morrison AC, Zielinski-Gutierrez E, Scott TW, Rosenberg R. 이집트숲모기(Aedes aegypti) 바이러스 매개체 제어를 위한 과제 파악 및 해결책 제시. PLOS Medicine. 2008;5:362–6.
질병통제예방센터(CDC). 뎅기열, 곤충학 및 생태학. 2016. http://www.cdc.gov/dengue/entomologyecology/. 접속일: 2017년 1월 6일
Ohimain EI, Angaye TKN, Bassey SE 말라리아 매개체인 Anopheles gambiae에 대한 Jatropa curcas(대극과)의 잎, 나무껍질, 줄기 및 뿌리의 살충 활성 비교. SZhBR. 2014;3:29-32.
Soleimani-Ahmadi M, Watandoust H, Zareh M. 이란 남동부 말라리아 박멸 프로그램의 말라리아 지역에서 아노펠레스 유충의 서식지 특성. Asia Pacific J Trop Biomed. 2014;4(Suppl 1):S73–80.
Bellini R, Zeller H, Van Bortel W. 서나일 바이러스 발생의 매개체 방제, 예방 및 관리 접근법과 유럽이 직면한 과제에 대한 고찰. 기생충 매개체. 2014;7:323.
Muthusamy R., Shivakumar MS. 붉은 애벌레(Amsacta albistriga Walker)의 시퍼메트린 내성 선택 및 분자 기전. 해충의 생화학적 생리학. 2014;117:54–61.
Ramkumar G., Shivakumar MS. Culex quinquefasciatus의 페르메트린 내성 및 다른 살충제에 대한 교차 내성에 대한 실험실 연구. Palastor Research Center. 2015;114:2553–60.
마츠나카 S, 허트슨 DH, 머피 SD. 살충제 화학: 인간 복지와 환경, 제3권: 작용 기전, 대사 및 독성학. 뉴욕: 페르가몬 출판사, 1983.
Chareonviriyaphap T, Bangs MJ, Souvonkert V, Kongmi M, Korbel AV, Ngoen-Klan R. 태국에서 살충제 저항성과 인간 질병 매개체의 행동 회피에 대한 고찰. 기생충 매개체. 2013;6:280.
Chareonviriyaphap T, Aum-Aung B, Ratanatham S. 태국 모기 매개체의 살충제 내성 현황. Southeast Asia J Trop Med Public Health. 1999;30:184-194.
Chareonviriyaphap T, Bangs MJ, Ratanatham S. 태국의 말라리아 현황. 동남아시아 공중보건 저널(J Trop Med Public Health). 2000;31:225–37.
Plernsub S, Saingamsuk J, Yanola J, Lumjuan N, Thippavankosol P, Walton S, Somboon P. 태국 치앙마이에 서식하는 이집트숲모기(Aedes aegypti)에서 F1534C 및 V1016G 녹다운 내성 돌연변이의 시간적 빈도와 피레트로이드를 함유한 열안개 분무제의 효율에 미치는 돌연변이의 영향. Aktatrop. 2016;162:125–32.
Vontas J, Kioulos E, Pavlidi N, Moru E, Della Torre A, Ranson H. 주요 뎅기열 벡터 Aedes albopictus 및 Aedes aegypti의 살충제 저항성. 해충의 생화학적 생리학. 2012;104:126–31.
게시 시간: 2024년 7월 8일